سم الله الرحمن الرحيم

 

السلام عليكم ورحمه الله وبركاته

 

أزيكم اخوانى فى الله

 

بعد ما اتكلمنا عن مزرعه البول ومسحه العين وتقسيمه الميديا

 

تعالوا معايا ناخد مزرعه تانيه وكائنات اخرى ننم عليهم شويه وربنا يغفر لنا بقا على النم ده

 

النهارده هنتكلم عن مزرعه وقبل مااقول اسمها لازم نعطر الجو بمعطر وتشغل المروحه عشان الريحه

 

مع انى شايف انكم خلاص اتعودتم على الريحه دى

ربنا يعطيكم العافيه ويفتح عليكم يارب العالمين

النهارده هنتكلم عن مزرعه الستول

وهنبداء الاول اننا نعرف يعنى ايه مزرعه الستول

اولا

====

ما هى مزرعه الستول ؟

Stool Culture؟

============

The stool culture is a test that detects and identifies bacteria that cause infections of the lower digestive tract. The test distinguishes between the types of bacteria that cause disease (pathogenic) and the types that are normally found in the digestive tract (normal flora). The test helps to determine if pathogenic bacteria are the cause of gastrointestinal symptoms (gastroenteritis).

===========================================================

ثانيا

=====

ماهى الحالات التى تتطلب عمل مزرعه الستول ؟

 

1- Nausea, vomiting

2- fever

-3- stool contaning-blood – pus –-diarrhea

4- mucuos in the stool

– 5- abdominal pain and cramping and nausea

If diarrhea lasts more than a few days, it may lead to complications such as dehydration

and electrolyte imbalance – dangerous conditions, especially in children and the elderly

 

Dehydration can cause symptoms such as dry skin, fatigue, and light-headedness

============================================================

ثالثا

=====

ماهى الاحتياطات الواجب مراعتها عند اخذ العينه؟

 

لازم تكون عينه فريش مش وخده شور ولا حاجه  لا لازم ما يمرش على العينه لكتر من ساعه  ولو عرفت 1-تشتغلها حين وصول العينه يكون افضل

 

2-غير ملوثه بماء بول

3– يرفض عينات الموجوده بداخل علب الكبريت والعينات  الموجوده على ورق الشجر

4-اخذ العينه فى اناء معقم

5- تدوين اسم المريض والكود  على العبوة وفر وصولها للمعمل

6- وطبعا دى  لازم فى كل مزرعه ان المريض بيمتنع عن اخذ اى مضاد حيوى  لمده 48 ساعه اذا كان بياخد مضادات حيويه

============================================================

رابعا

======

ماهى طرق العدوى بالميكروب الممرض ؟

 

 

Pathogenic bacteria can enter and infect the digestive tract when someone eats food or

drinks water that is contaminated. Examples of contaminated sources include raw

or undercooked eggs, poultry or beef, unpasteurized milk, and untreated water form

lakes, streams, and (occasionally) from community water supplies

 

============================================================

كده تمام اوى ندخل بقا على الشغل العملى بعد ما جتلك العينه وكل شروط متوفرة وكل حاجه زى الفل

 

يلا تعالى معايا نشوف احنا هنزرع المزرعه دى على انهى نوع من الميديا من الانواع ال انت اخدتهم المحاضرة الماضيه

 

ما هى انواع الميديا المستخدمه فى زراعه stool culture ؟

– enriched and selective media

– blood agar plate

– MacConkey agar plate – XLD (xylose lysine desoxycholate) plate

-TCBS media for Vibrio cholerae

– S S media for Salmonella Shigella

خلاص كده معاك عينتك ومعاك طبقك ومطوتك فى جيبك وسندوتشاتك فى ايدك تعالى يلا ندخل غرفه العمليات ونقفل الستاره ونشوف هنشتغل ازاى فى العمليه الصعبه دى ربنا يستر معانا ولد ولا بنت يارب ولد بنت ولد بنت

ولد وبنت ايه بس دى مش حامل

طيب نحضر طبق الميديا

ودا رابط بيوضحلك ازاى تجهز طبق الميديا بتاعك

http://www.youtube.com/watch?v=X5dU98-K5_g

============================================================

خطوات العملى

===========

الطريقه الاولى

===========

اولا

تقوم بتعقيم اللوب طيب ازاى انا بعقم اللوب

بعقم اللوب بحيث يكون واقف رائسى يعنى عمودى على اللهب يعنى ايدك واللوب خط مستقيم وليس افقى

 

طيب انا عقمت اللوب هتسيبه من دقيقه للدقيقتين فى الهواء الهواء الموجود جمب اللهب حتى يبرد لان حضرتك لو اخدت المسحه على طول واللوب سخن يبقا هتموت الجنين قبل ما تزرعه

 

ثانيا

-هتاخد مسحه من العينه طيب انا هاخد من اى جزء لا طبعا انت هتاخد من الجزء الموجود به الدم او المخاط او الصديد

 

ملحوظه هاااااااااااااااااااااااااامه

اوعى تعطس او نفسك يجى فى الطبق وانت شغال وطبعا لازم يكون شغلك كله باالقرب من اللهب

 

ثالثا

 

تقوم بعمليه التخطيط على طبق الاجار

 

وانا جبتلك رابط يوضحلك ازاى تخطط على الاجار عشان الدكتور ال كان بيقول ان ايده ثقيله وبيجرح الاجار وهو شغال

اتفضل يابروف

http://www.youtube.com/watch?v=_1KP9zOtjXk

كده خلاص كله خطط

تمام كده

============================================================

الطريقه الثانيه

==========

تاخد جزء من الستول وتضعه فى محلول وتدوبه كويس جدا 1-

2- تقوم بصب جزء من العينه فى الطبق

3- تقوم بصب الميديا على العينه الموجوده بالطبق

4- تحرك الطبق على حرف 8 حتى تقوم بتوزيع الكائن على طبق الاجار بالكامل

5- اترك الطبق فى الهواء حتى يتصلب

كده بعد ما كلنا خلصنا سواء بالطريقه الاولى او الطريقه الثانيه تقوم بوضع الطبق فى الحضان

استنى انت هتحط الطبق كده

اه امال اعمل ايه

لالالالالالالالالالالا

لازم تقلب الطبق اوعى تنسى  الله يكرمك

بحيث يكون الطبق اعلى والغطاء اسفل

بعد كده

نترك الطبق لمده 24 ساعه حتى يحصل النمو طيب لو محصلش نمو يبقا اسيب الطبق كمان 24 يعنى 48 ساعه ولازم تلاحظ حاجه ان الكائن ليهoptimum temp

يعنى ايه يعنى لو حضرتك محضن عند 31 ترفع درجه الحراره لل 37

لان فيه عندنا حاجه اسمها Bacterial groth curve

انت هتوجع دمغنا ليه ياعم

 

معلش يادك استحمل شويه

 

حاضر ياسيدى ودى ايه حكايتها هى كمان

 

هقولك متخفش بس الاول صل على حبيبك النبى عليه افضل الصلاة والسلام

ودى صورة بتوضح

Bacterial groth curve

================

ودا بينقسم الى اربعه

1- lag phase

2-Logarthmic phase

3- Statinary phase

4- Decline phase

 

تعالى يلا نشوف ايه دول ويعنى ايه

انت غاوى وجع قلب يادكتور قلتلك معلش استحملنى

 

Lag phase

=========

This is the stage of preparation for

multiplication during which the organisism adapts it self by the synthesis of

new enzymes specific for new medium there is no increase in the number of bacteria

 

2-Logarithmic phase

===============

This is the phase of rapid multiplication theis phase a straight line is obtained if the logarithm of the number of organisms is plotted against time in this phase accumulation of metabolic products and O2

 

3- Stationary phase

==============

During this phase any bacterial multiplication is balanced by an increased death rate and the number of living organisms remains constant  although the total bacterial count rises slowly

 

4-Decline phase

==============

 

The number of living organisms until all are

dead and the culture becomes sterile

ودى صوره بتوضح اكتر

ودا رابط الصورة حتى تتمكن من مشاهدتها بوضوح http://www.facebook.com/photo.php?fbid=283820035035534&set=o.169696833071927&type=1&theater

This phase which ends with complete curve

 

 

ودا رابط بيوضح اكتر الشرح

http://www.youtube.com/watch?v=NaFg8yU039Y

 

 

بعد ما حضنت وخلاص حصل معاك النمو

تعالى معايا بقا تشوف النمو ال عندك وشكل المستعمرات ايه وهنا يجى دور التعرف على الكائنات من

الشكل الخارجى وايه هى الكائنات المتوقع وجدها فى المزرعه

 

بس انا مش هقول غير لما تسمعنى الصلاة

على حبيبك النبى عليه افضل الصلاة والسلام

 

=============================================================

ماهى الكائنات المتوقع وجدها فى مزرعه الستول ؟

 

Salmonella

Shigella

Campylobacter

Escherichia coli 0157:H7

Clostridium difficileAeromonas species

Staphylococcus aureus

Yersinia enterocolitica

Vibrio cholerae

and other Vibrio species

Klebsiella

Enterobacter

 

كده عرفت الكائنات ال ممكن تكون موجوده عندك فى الطبق

 

طيب تعالوا معايا بقا ننم شويه على كل

كائن منهم يلا بقا ربنا ييغفرلنا على النميمة

هنجيب فى سيرة الناس كده وكمان  نقطع فى فروتهم بس يلا وكمان بالمرة بقا بدال هنم نذكر بعض الخصائص الهامة ليهم ال ممكن تفيدك فى كتابه التقرير بتاعك

Salmonella

========

وناخد اول كائن ونقوله هاى Salmonella

هاى دكتور خدت بالك من هاى دى مش اى حد يقولها ومش اى حد يرد عليك

ممكن نسئلك بعض الاسئله اتفضل

 

ممكن نعرف بحضرتك  انت ليكى كام اخت ومن انهى عائله

وكان ردها بعد ما ترجمت اللغه بعتها لان ليها لغه خاصه بيها

 

the genus includes many types ( more than 1.500) which are parasites of the man and animals

Gram negative

bacilli ,motile

non capsulated

non spore forming

They do not ferment Lactose or sucrose

indole negative

وشكلها علىon MacConkeys medium

Pale yellow colonies

 

1-

salmonella Causing enteric fever which is caused by either S . typhimurium or

S.paratyphi

 

2- Salmonella causing food poisoning which is

caused by either S .typhimurium or S enteritidis

 

The disease is in the form of acute

enterocolitis because both the small and large intestines are affected

 

وكده كفايه عليها اوى

ودا رابط يوضحلك ازاى تتعرف عليها

http://www.youtube.com/watch?v=UtkFTIcA9pg

====================================================

Shigella

======

Gram negative bacilli

Non motile

Non spore forming

They are the causative organisms of bacillary dysentery

 

ودى بتعطى اللون pale yellow or colourless colony

in  MacConkey plate

ودا الرابط بتاع الصورة عشان لو مش وضحهhttp://www.facebook.com/photo.php?fbid=283819618368909&set=o.169696833071927&type=1&theater ودى صوره توضح

===================================================

Campylobacter

============

Gram negative curved bacilli

Motile

 

The widespread use of selective media greatly

increased the of Campylobacter as common cause of diarrhea in humans

Laboratory Diagnosis

 

Stool culture on selective medium at elevated

incubation temp ( 42c)

The growth appeas after 48-72 h

The colonies are oxidase and catalase positive

 

===================================================

Clostridium

=========

This is include anaerobic

Gram positive

Spore forming bacilli

4 types

1- C tetani

2- c Causing gas gangrene

3-C botulinum

4- c difficille

احنا هناخد الاخيرة فقط

C difficile

 

Is the part of the normal intestinal flora in a

small proportion of healthy persons and hospitalized patients

C difficle produces tow toxins

1- Enterotoxin ( Toxin A)2- Cytotoxin (Toxin B)

 

====================================================

Staphylococcus

============

Gram positive cocci

Non spore forming

Nonmotile-                                                                                                                                                        

1- S albus (epidermidis ) which gives ( white colonies

 

2 -staph aureus  which gives golden yellow colonies-                                                                                                                                                        

3- S citreus  which gives lemon colonies

وطبعا الموضوع كبير جدا ولو اتكلمت فيه عن ال staphylococcus  هياخد وقت كبير وكلام كتير جدا ممكن نبقا ناخد حلقه عنها او ننفرد بكل كائن على حده هيكون الكلام اكتر واكتر عشان مطولش عليكم

==================================================

Yersinia

=======

 

This group consists of a number of small gram negative

 

Short bacilli ( cocco –bacilli )

 

These organisms are essentially animal

parasites and can be transmitted to man

The optimum temp27-37

It produces a capsule

 

=================================================

Vibrio cholerae

=========The genus Vibrio consists of Gram negative

Motile bacilli possessing apolar flagellum

Not form spores

Can grow aerobicallyor facultative

anaerobically on a variety of simple media even at high alkaline ph like

peptone water and N agar

Late lactose fermenter and oxidase positive

Vibrio cholerae

Can be subdivided into 6 groups

 

================================================

Escherichia coli 0157:H7 and

====================

Gram negative bacilli

Non spore forming motile

Non capsulated

Facultative anaerobic

Grow in ordinary media

Reduce nitrates to nitrites

Lactose fermenters coliform bacilli produciing`

E .coli (most strains of E. coli are considered normal flora and do not

cause disease) – found in raw or undercooked hamburger/beef, spinach, or

unpasteurized cider; causes bloody diarrhea and may lead to hemolytic uremic syndrome

=====================================================

 

Klebsiella

===========

G –ve

Small bacilli

Non motile

non spore forming  forming capsulated Colonies in MacConkeys ( Mucoid ) and lactose fermenters ( Rose pink colonies “)

 

Divided

to 72 serotypes  the most important

species are

1- K pneumoniae

2-Kozaenae 3 -K rhinoscleromatis

 

 

=======================================================

انا بعتزر جدا لان باقى الصور كانت موجوده عندى ولكن الجهاز اتفرمت والله كان نفسى انزلها بس حصل خير ان شاء الله اول ما اجد صور هنزلها على طول

كده يبقا عرفنا خصائص كل كائن بس طبعا  باختصار كبير جدا لان لو اتكلمنا عن كل كائن هياخد حلقه لوحده

 

بعد كده نعمل ايه

 

لا يادكتور انا مش هقولك حاجه تانى عشان انت بخيل جدا جدا مفيش شاى ولا حاجه ساقعه كده بقالى ساعه بتكلم يادك

 

طيب يلا نصل على النبى ونكمل

عليه افضل الصلاة والسلام

 

ايوا

كده  اقولك يادك تعمل ايه

 

نفرض انى معرفتش الكائن من الشكل الخارى بتاعه اعمل ايه اقولك انت تعمل صبغه جرام G- ve &g +ve

ودى الصورة ال نزلت المحاضرة ال فاتت عشان التكرار بيعم الشطار

ودا رابط الصورة حتى تتمكن من مشاهدتها بوضوح

http://www.facebook.com/photo.php?fbid=283819305035607&set=o.169696833071927&type=1&theater

وتكمل عادى تبداء تاخد مسحه من النمو البكتيرى

وتزرعه على طبق تانى وتتركه لمده 24 ساعه حتى ينموا

ثم تقوم بوضع المضادات الحيويه

ودى صورة بتوضح

اخيرا هذكرلك بعض المضادات الحيويه الهامه التى توثر على كل كائن موجود معانا

 

Salmonella==========chloramphenicol ,

ampicillin,ciprofloxacacin or acombination of trimethoprim and sulfamethoxazol

Proteus ========== Broad spectrum ab

 

Shigella=========Sulfaguanidin , Chloramphenicol ,

Tetracyline

 

Campylobacter

=========erythromycin

and tetracyclines

 

=helicobacter======Current therapy includes the use of

bismuth salt with mitronidazol and either amoxicillin or tetracycline

Calrithromycin-

Amoxicilin

Metronidazole

omeprazole

 

Yersinia enterocolitica=========streptomycin ,tetracycline

Staphylococcus aureus=========penicillin

 

واخر

حاجه هقولها انى اكتبلك كل المضادات الحيويه كلها مع بعضها بعض ما وضحتلك كل واحد

بياثر على انهى كائن واضافه للمضادات الحيويه ال ذكرتها الحلقه الثانيه

 

chloramphenicol

ampicillin

ciprofloxacacin

trimethoprim

sulfamethoxazol

Sulfaguanidin

Chloramphenicol

mitronidazol

Amoxicillin

Tetracycline

streptomycin

 

واخيرا

اعتزر على الاطاله واتمنى لكم العلم النافع

و يارب   مكنش طولت عليكم بس غصب عنى فعلا ولو عوزنى اتكلم عن كل كائن لوحده بالتفصيل انا تحت امركم

وجزاكم الله خيرا

انتظرونى مع حلقه قادمه ان شاء الله

اخوكم

أحمد محمد عبدالله

د ماجستير ميكرو جامعه الازهر الشريف

السلام عليكم ورحمه الله وبركاته

 

 

أزيكم اخوانى فى الله

 

يارب تكونوا بخير وفى اتم صحه وعافيه

 

النهارده مش هنتكلم فى مزرعه ولكن هنتكلم فى حاجه هامه جدا عشان تقدر تشتغل مزرعتك صح وطلع نتايج صح وتقدر تنمى الكائن بتاعك فى وسط هو بيحبه ويظهر معاك بكل سهوله ويسر

 

هنوضح النهارده بعض النقاط الهامه

 

فى عالم الميكرو بيولوجى عالم الحقيقه والاثارة والاشتياق

 

النهارده هنتكلم عن

 

Classification of culture media

 

لان كل كائن ليه ظروفه الخاصه بيه فيه كائنات بتحب السمك وكائنات بتحب الحمه والمكرونه

وكانت بتحب الشاى سكر زياده

 

وكائنات عمله رجيم عمله ديت واهم حاجه عندها يكون البيبسى يكون دايت

 

تعالى نشوف علماء الميكرو بيولوجى قسموا الميديا الى كام نوع عشان تقدر تحدد انت هتختار انهى نوع من الميديا تشتغل بيه مزرعتك السعيده

 

بس الاول لازم تصلى على حبيبك وحبيبى طب القلوب صل الله عليه وسلم

عليه افضل الصلاة والسلام

Classification of culture media

 

1-       ordinary media

 

a – Liquid ordinary media

b- Solid ordinary media

 

2-      Enriched media

 

a- Blood agar

b- Chocolate agar

c- Loffers serum medium

d -Lowenstein Jensen medium

e -Dorsets egg medium

 

3-         Selective indicator media

 

a- MacConkeys medium

b- Blood Tellurite medium

c- D.C.A (desoxycholate citrate agar )

d- T. C. B .S

 

4-          Enriched media

 

5-           Sugar media

 

خلاص كده عرفنا تقسيمه الميديا الممكن تزرع عليها مزرعتك السعيده

تعالى بقا معايا نعرف تركيبه كل نوع وايه استخدمات كل نوع

 

بس الاول لما تسمعنى الصلاة على افضل حلق الله سيدنا محمد صل الله عليه وسلم

 

ناخد اول نوع وهو

 

 

1- Ordinary media

================

These may be Liquid or solid

 

a -Liquid ordinary media

================

Broth ( Clear yellowish)

 

This is meat infusion to Which 1% peptone 0.5 % Na Cl are added

Peptone water ( clear colorless ) composed of 1% peptone and 0.5 % NaCl

 

Uses Of peptone Water

As base For Sugar mediae

to test for indole production

 

b-   Solid ordinary media

=================-

Nutrient agar   : Agar is prepared from sea weeds called agar agar in the from of powder Tow to three percent of agar is dissolved in broth by boiling then filtered and left to cool at room temp to solidify

 

==============================================================

ثانيا

 

2- Enriched media

================

 

These media are used mainly to culture nutritionally demanding which can not grow on ordinary media eg

Gonococcus,meningococcus,haemophilus,pneumococcus ….

The most frequentiy used enriched media are

 

 

a – Blood agar

===============

this is prepared by melting nutrient agar at 100 Cthen allowing it to cool at 50- 45 Cthen 5-10%defibrinated sterile sheep or horse blood is added and mixed well than left to cool at room temp

blood agar is also used to test the haemolytic activity of different bacteria on erythrocytes

 

alpha- B – no haemolytic at all

 

b- Chocolate agar

==============

 

this is prepared as blood agar but after the addition of blood the temp is raised to 80 C for 2-5 min it is brown in colour

used particularly for the isolation of haemophilus species and pathogenic Neisseria

 

e– Loffer s serum medium

===================

 

composed of three parts horse serum and one part glucose broth

it is asolid opaque whitish medium useful for the growth of corynebacterium diphtheriae

 

d-     Lowenstein Jensen medium

=======================

 

Composed of

beaten eggs ,malachite green,asparagine and glycerol

The medium is poured in screw capped bottles to prevent dehydration and then sterilized in the same way as lofflers serum

it is used for

=======

isolation of mycobacterium tuberculosis     especially from sputum or stool

 

e – Dorsets egg medium

==================

 

Used for the isolaton of tubercle bacilli when present in non contaminated material such as C S F

 

============================================================

ثالثا

 

3- Selective and indicator media

====================

 

a- MacConkey medium

===============

Composed of

 

1-bile or Na taurrocholate to inhibit the growth of non intestinal microorganisms

2-peptone to support growth

3-  Lactose as sugar tested

4- Neutral red indicator to indicate the fermentation of lactose

5- Agar to obtain solid medium

 

Uses

====

 

To differentiate between lactose fermenting and lactose non fermenting enteorbacteriae

 

Lactose fermenterg give rose pink colonies while lactose non fermenters give pale yellow colonies

 

b -Blood tellurite medium

it is used for isolation of corynebacterium diphteriae when it is present in contaminated material

Tellurite inhibits the growth of other bacteria but not that of C diphteriiae

it is also used in classification of C . diphtheriae into mitis ( black colonies ) gravis ( gray colonies ) and intermedius types

 

b – D. C. A (desoxycholate citrate agar )

========================

 

This is used to isolate salmonellae and shigellae Both give pale yellow colonies as they are lactose non fermenters

This medium is selective for salmonellae and shigellae because

 

It inhibit the growth of most non pathogenic intestinal bacteria such as E coli

 

d.= T.C.B.S

===========

 

This is a selective medium used for the isolation of Vibrio cholerae

It is an alkaline agar medium containing sucrose and an indicator dye the commensal intestinal organisms are mostely suppressed and V cholerae grows producing ayellow colony

 

e- Blood tellurite medium

================

it is used for the isolation of Corynebacterium diphteriae when it is present in contaminated material

Telluriae inhibits the growth of other bacteria but not that of C diphtheriae into mitis ( black colonies ) graves ( gray colonies ) and intermedius types

===========================================================

ررابعا

 

4- Enrichment media

==============

these are fluid media , e g selente and tetrathionate broth which contain astimulate the growth of certain pathogenic bacteria as salmonellae and shigellae but not others

 

======================================================

خامسا

 

5-   Sugar media

===========

 

These are media used to test biochemical activity of bacteria on carbohydrates

Composed of sugar , peptone water and Andrade s indicator

A small inverted tube called

Durham s tube

is immersed in the medium for the collection of gases

Litmus milk is a similar medium used to test the action of bacteria on milk composed of free cream milk and few drops of litmus solution

وفى النهايه دى بعض الروابط الهامه لشرح الفيديوا

مقدمة فى طرق زراعة الميكروبيولوجيا    

Introduction to Microbiology Culture Techniques

 

http://www.youtube.com/watch?v=Et1v8EQP10U

 

كيفة تحضير ميديا اجار الدم لزراعة البكتريا

How to make blood agar plate

 

http://www.youtube.com/watch?v=X5dU98-K5_g&feature=related

 

 تحضير ميديا اجار الدم اتوماتيكيا لزراعة البكتريا

Automated making blood agar plates

 

http://www.youtube.com/watch?v=3ZQ9zphKX-s

مقدمة فى ميديا زراعة الميكروبيولوجيا وانواع الميديات المختلفة

Introduction to Microbiology Culture  media

 

http://www.youtube.com/watch?v=EoQEgVxxDxI&feature=related

 

الميديا الاختيارية والميديا التفريقية لزراعة البكتريا

selective and differential media

 

http://www.youtube.com/watch?v=gKA_VLC4-jQ&feature=related

 

 

وجزاكم الله خيرا

اتقدم بالشكر لكل اعضاء الجروب

انتظرونى مع حلقه اخرى

وكائنات اخرى

ومعلومه تهمك فى عالم الميكروبيولوجى

د/احــمــد عبدالله

السلام عليكم ورحمه الله وبركاته

 

ازيكم جميعا اخوانى  فى الله

 

أشهد الله انى احبكم فى الله

 

بعد ان قدمت لكم اول مزرعه وهى مزرعه مسحه من العين

eye culture

 

ووعدتكم انى هقدملكم حلقه اخرى مع كائنات اخرى ومزرعه اخرى

 

وتعالو معايا نغوص مع عالم الميكرو بيولوجى عالم الحقيقه والاثارة

 

وهيكون القاء اليوم لقاء مع مزرعه معظم الناس بتشتغلها او بتجلهم المعمل او بيتعرض للكلام مع المريض عنها

 

الا وهى مزرعه البول urine culture

 

وكفايه كلام بقا ونتكلم فى الموضوع المهم بس قبل ما نتكلم عن مزرعه البول

 

اردت ان اوضح بعض الاشياء الهامه وهى ولازم انت تعرفها

 

ازاى نفرق بين Culture – Sensitivity؟

 

Culture:

=========

is done to find out what kind of organism (usually a

bacteria) is causing an illness or infection

 

 

Sensitivity

=======

 

test checks to see what kind of medicine, such

as an antibiotic, will work best to treat the illness or infection

 

تمام كده سوال بقا ايه هى انواع المزارع ال ممكن تتعرضلها فى المعمل ولازم يكون عندك فكرة عنها ؟

طيب هقولك بس لما تسمعنى الصلاة على حببى وحبيبك طب القلوب سيدنا محمد صل الله عليه وسلم

 

A culture and sensitivity test may be done on many different body fluids, such as

• urine
• mucus
• blood
• pus
• saliva
• breast milk
• spinal fluid
• discharge from the vagina
• discharge from the penis
• Stool

 

نبداء بقا كلمنا عن مزرعه البول

 

اولا ايه هى الاسباب ال ممكن تخليك تعمل للمريض مزرعه بول او الطبيب المتخصص يطلبها من المريض ؟

 

 

طبعا بنعملها فى حالات كثيرة منها..

 

فى حاله الم فى الاعضاء التناسليه–

 

فى حاله مرض البول الصديدى يعنى وجود صديد بعينه البول-

 

فى حاله البول الدموى يعنى وجود نسبه دم عاليه فى عينه البول-

 

فى حاله وجود بكتريا بعينه البول-

 

فى حالات امراض الكلى-

او التهابات المجرى البولى والتى بينتج عنها وجود كمية كبيرة من الصديد بالبول

 

خلاص عرفنا ممكن تنطلب امته مزرعه البول طيب يا دكتور خلاص المريض خالك عشان يعمل المزرعه ايه هى

 

الارشادات التى يجب ان تتوفر فى اخد عينه لمزرعه البول

 

وجود كوب معقم بقوم المريض بجمع العينه به

 

يتم غسل منطقة التبول جيدا بالماء والصابون ثم بالماء فقط حتى يزيل اثار الصابون

 

يطلب من المريض العينه الوسطى من البولmidstream urineوهى بان يقوم المريض بترك اول جزء من البول النزول وياخذ الجزء الاوسط

والامتناع عن تناول المضادات الحيويه 4-5 ايام لتجنب النتايج السلبيه الخاطئه

 

خلاص يادكتور كل الشروط دى متوفرة والمريض جبلك العينه نبداء بقا اول خطوة عملى

 

خطوات العمل

 

طبعا بعد ما اخدت العينه ودونت عليها كود المريض والاسم والسن وكل البيانات

 

ومعاك العينه تقوم باخذ جزء منها بالوب وتقوم بالزرع

 

طبعا انت كنت عامل قبل كده للمريض بول كامل وعارف انه عنده صديد او دم بالعينه او خلايا بشريه او اسطونات

 

ايه هى انواع الميديا المستخدمه فى الزرع ؟

 

Blood agar  –  macconkey agar -– CLED

 

طيب انا كل حاجه متوفرة معايا دلوقتى العينه والميديا

 

اغلق الستاره بقا

 

وتعالى يلا معايا ندخل عالم الميكرو

نبدا اول خطوة عملى

=============

باستخدام اللوب بعد تعقيمه بالهب ثم غمسه بالكحول حتى لا تقوم بقتل البكتريا تاخد مسحه من العينه ثم تقوم بالتخطيط على طبق الاجار ودا كله بيتم بجوار اللهب طبعا عشان الوسط الموجود جمب اللهب لا يوجد به اى نوع من انواع البكتريا ولا يحدث تلوث للعينه

 

خلاص خلصت تخطيط انا شايف واحد هناك لسه يخطط خلصت تمام كده خلاص ولا لسه

 

ايه يا دكتور كنت عاوز اسئل مفيش طريقه تانيه غير التخطيط دى دى صعبه اوى اصل انا لسه بتعلم وايدى تقيله وجرحت طبق الاجار

 

بس كده من عنيا بس طريقه التخطيط مش صعبه ولا حاجه

 

هقولك بس ما تخلكش بخيل كده

انا ؟

 

ايوه انت بخيل

بقالى ساعه بتكلم وحتى مفيش حد سمعنى الصلاة على حبيبى وحبيكم سيدنا محمد عليه افضل الصلاة والسلام

 

بص ياسيدى الطريقه التانيه

=================

انك تاخد جزء من العينه وتضعها فى الطبق ثم تقوم بصب المديا عليها وتقوم بتحريك الطبق على شكل حرف 8

حتى تقوم بتوزيع الكائن على جميع الطبق

تمام كده

بعد ما قمنا بطريقه الزرع

نقوم بوضع الطبق فى الحضان لمده 24 ساعه

و بعد كده نشوف النمو

كيفية زراعة عينات البول على اطباق الماكونكى واطباق اجار الدم 1Quantitative Urine culture ( Blood & macconkey ) 1 http://www.youtube.com/watch?v=CStD8gVjIJs

 

 

كيفية زراعة عينات البول على طبق خاص للبكتريا الممرضة فى البول

Urine culture (semi-quantitative) on CLED agar

http://www.youtube.com/watch?v=3Lp9U8pfiew

تعالى بقا ايه هى الكائنات ال ممكن تظهر معايا فى عينه البول

 

هقولك متخفش ومش تقلق

 

urinary tract infections

–   E colil

–         Staphylococcus

–         Saprophyticus

–          Klebsiella

–         Proteus

–          Pseudomonas aeruginosa

–         Other Enterobacteriaceae

 

دول بس على سبيل المثل ولكن يوجد الكثير والكثير

خلاص كده يادكتور انا شايف ناس نامت خلاص قربنا نخلص

 

تعالى بقا نفرق بين البكتريا وبعضها من الشكل الظاهرى من النمو على الطبق بين الكائنات وبعضها

 

E colil

=======

 

ودى شكلها احمر على ال

macconkey agar

وتخمر اللاكتوز

واصفر على ال cled

 

Klebsiella

========

 

لونها احمر مخاطى على الماكونكى ( تخمر اللكتوز والبكتريا تحاط بكبسول ) واصفر مخاطى على ال

cled

 

 

Proteus

========

لونها ابيض دائرى متعرج على

Blood agar

ولها رائحه السمك

ولونها ازرق على ال

cled

 

 

Pseudomonas

==========

لونها مخضر على cled وال Blood agar

 

والجزئيه دى استاذنا الدكتور ياسر ربنا يبارك فيه كان وضحها قبل ذالك

 

فيه اختبارات كميائيه ممكن نستخدمها فى التفرقه ايضا

 

=============================================

ظهور البكتيريا بلون روز ونوع البكتريا فى هذه الحاله يااما

E-Coli – او klebsiella

 

نقرق بين النوعين من البكتيريا بواسطه اختبار كميائى بسيط وهو

(indole test)

يكون ايجابى فى حاله

E coli

 

klebsiellaوسلبى فى حاله

 

============================================

ظهور البكتيريا بلون اصفر باهت ونوع البكتريا فى هذه الحاله ياما

 

proteus) او (pseudomonas

 

نقرق بين النوعين من البكتيريا بواسطه اختبارين كميائيين وهما

 

(urease test)>> ايجابى فى حاله الـــ (proteus)…

 

(pseudomonas) (oxidase test)>> ايجابى فى حاله الــــ

 

 

اما بالنسبه لــ (blood adar)>> بنشوف هل البكتيريا محلله للدم ام لا …haemolysis or non

 

–         ويوجد عندنا 3 انواع من Haemolysis

 

1- Alpha haemolltic

2- Beta haemolytic

3-   Non haemolytic

 

 

–   اولا

=======

Alpha haemolltic

–    these act enzymatically on blood pigment but do not cause complete lysis of R B cs   so the colonies are surrounded by a greenish zone as

–    Strep Viridans

– Pneumococcus

 

ثانيا

======

 

–         Beta haemolytic

–         These case complete lysis of the RB c sby the action of haemolysins so the colonies are surrounded by aclear zone as

–         S pyogenes

–         S aureus

–         Clostridium group

–         El tor vibrio

 

ثالثا

======

Non haemolytic

 

–         The organisms neither act enzymatically nor cause lysis of the RBCs so there is nochange in the blood agar as

–         Strept Foecalis

–         Non pathogenc staph

–         Nesseria

–         Vibrio cholerae

 

انا كده رخمت اوى وطولت عليكم بس اعزرونى لازم المزرعه تخلص

نيجى بعد كده بقا لمرحله الصبغه

ودى مش هتكلم فيها ولكن هكتفى بصورة موضحه وال عوزنى اكتبله الطريقه يقول

ا

 

 

اخر مرحله من مراحل التحليل؟؟

 

نقل جزء بسيط من النو البكتيرى باستخدام اللوب وزراعته على طبق جاهز من

(nuterient agar

وعند النمو نقوم بوضع المضادات الحيويه بشكل منتظم وعلى مسافات منتظمه

ثم نقوم بالتحضين لمده 24 ساعه

:نظرة عامة عن كيفية زراعة عينات البول

Overview urine cultures

 http://www.youtube.com/watch?v=FOimwWEV6vU&feature=related

 

 

=========================================================

نيجى بقا ازاى نختار المضاات الحيويه وهل فيه مضادات حيويه خاصه بالاطفال والرضع

 

 

antibiotic Code

Ampicillin : AMP ِ

 

Ampicillin+Sulbactum : SAM

 

:

Azetreonam : ATM

 

:

Amikacin : AK

 

:

Cefuroxime :CXM

 

:

Chloramphenicol : C

 

:

Cephalexin CL

 

:

Cefoxitine : FOX

 

:

Ceftazidine : CAZ

 

:

Ciprofloxacin : CIP

 

:

Cefamandole : MA

 

:

Ceftriaxone : CRO

 

:

Cefoperazone: CFP

 

:

Cefotaxime : CTX

 

:

Cefepime : FEP

 

:

Enrofloxacin :ENR

 

:

Gentamycin : GN

 

:

Impenem :IPM

 

:

Kanamycin :K

 

:

Metronidazole :MTZ

 

:

Naldixic Acid : NA

 

:

Neomycin : N

 

:

Nitrofurantoin F/M:

 

======================================================

Child , pregnant & lactatingودا ممكن نستخدم معاه بعض المضادات الحيويه السابقه ولكن باختلاف التركيز مثلا 750 او 500 جم

 

Amoxicillin AX 1

Ampicillin AM 2

Erythromycin E 3

Nitrofurantoin F 4

Amoxicillin + Glavulanic acid AMC 5

Ampicillin + Sulbactam SAM 6

Amikacin AK 7

Cefuroxime CXM 8

Clarithromycin CLR 9

Cefadroxil RFL 10

Cephalexin CL 11

Cefotaxime CTX 12

Cephradine CE 13

Flucloxacillin FL 14

Trimethoprim + Sulfamethoxazole (child only) SXT 15

Cefprozil

(child only) CPR 16

Adult

Rifamycin RF 17

Gentamycine GN 18

Doxycycline DO 19

Ofloxacin OFX 20

Gatifloxacin GAT 21

Norfloxacin NOR 22

Levofloxacin LEV 24

Tetracycline TE 25

ودى صورة بتوضحلك ازاى توزع المضادات الحيويه وازاى تعرف انهى مضاد حيوى اعطى معاك اكبر كلير زون

============================================================

 

اخيرااا كتابه التقريرويتم فيه تحديد الاتى

 

 

Bacteriological Report

Specimen

Organism

 

–         – انواع المضادات الحيويه الاكثر تاثيرا فى القضاء على البكتيريا…

Highly Sensitive to 

–         Moderately Sensitive to

–         Resistant to

واخيرا لانى بجد تعبت جدا لانى كتبت الموضوع ده مرتين واتمسح اتقدم بالشكر لجميع اعضاء الجروب

وانتظرونى مع مزرعه جديد وكائنات جديده اخوكم

احـــمـــد عــبــدالله

السلام عليكم ورحمه الله وبركاته

أشهد الله انى احبكم فى الله

انا أحبيت ان اقدم لكم مختصر عن عالم الميكروبيولوجى وازاى نقدر نعرف الميكروب الذى يصيب كل عضو فى

جسم الانسان وازاى ناخد العينه وازاى نتعامل معاها

اولا

ايه هو الميكروب ال ممكن يكون موجود معايا فى العينه ال انا خدتها من المريض

هنتكلم  اليوم مع اول مزرعه ممكن دكتور الرمد يطلبها وهىeye culture ملتحمه العين  بس عندى بعض الاسئله

اولا- ما هو التهاب ملتحمه العين؟

ثانيا -ما هى الاعراض والعلامات التى ادت الى ان طبيب العيون يطلب مزرعه؟

ثالثا- ودا اليهمنا  كا اخصائى تحاليل طبيه  ايه هو الكائن ال ممكن يكون موجود ويسبب التهاب للملتحمه حتى تتمكن من اختيار افضل مضاد حيوى ممكن؟

رابعا- ايه هى خطوات الوقايه ال ممكن تنصح بيها المريض ؟

=========================================

اولا

التهاب الملتحمه

هو التهاب او عدوى تصيب الملتحمه الملتحمه  هو  الغشاء الذى يغطى بياض العين ويغلف الجفون من الداخل عن الالتهاب

وغشاء الملتحمه يعمل على توسيع الاوعيه الدمويه الموجوده فيه وعندها تصبح العين حمراء لهذا السبب تسمى التهاب العين بالملتحمه الحمراء او الورديه

=======================================

ثانيا

ماهى الاعراض والعلامات التى ادت الى ان طبيب العيون يطلب المزرعه بس لازم نصلى على حبيبكم وحبيبى وطب القلوب سيدنا محمد صل الله عليه وسلم معلومه معلش كلمه صل تكتب هكذا ولا تكتب صلى

عليه افضل الصلاة و السلام

الاعراض هى

1-احمرار العين

حمرار وانتفاخ المنطقه حول العين  -2-

التصاق الرموش عند الاستيقاظ من النوم  -3-

كثرة الادماع او الافرازات -4-

5- حكه او حرقان فى العين

========================================

ثالثا

====

Eye infection by bacterial

اولا ايه هى الكائنات التى من الممكن ان تصيب العين

اللهم صل على سيدنا محمد خير البشر

1- Staphylococcus aureus  

2- Neisseria gonorrhoeae

3- Chlamydia trachomatis

دى اشهر الكائنات التى تصيب العين

طيب انا هاخد العينه ازاى

كيفيه اخد العينه من المريض

اولا

1-بتجيب المسحه (السواب ) الموجود عندك فى المعمل ودى متفتحاش الا عند اخد العينه حتى لا يحدث تلوث للسواب

2- بتفتح عين المريض براحه المطلوب لها المزرعه

3- تقوم بفتح السواب ثم تمررها على الملتحمه فى العين لانها اكبر منطقه تكون محمله بالبكتريا

ملحوظه وانت بتاخد العينه كن حريث جدا على المرض وكن واثق من نفسك وايدك متتهزش خالص

كيفية أخذ ماسحة الحلق( الزور ) وماسحة الانف وماسحة العين

Throat, Eye, Nose Swab collection

http://www.youtube.com/watch?v=a47Qr-uCqYA

ثانيا

بعد ما حصلت على العينه من المريض بتكون حضرتك مجهز الاطباق ال هتزرع عليها العينه ودى اما بتكون

Blood agar       –       Nutrient agar

Nutrient agar تتركب من

Nutrient agar is a microbiological growth medium commonly used for the routine cultivation of non-fastidious bacteria. It is useful because it remains solid even at relatively high temperatures. Also, bacteria grown in nutrient agar grows on the surface, and is clearly visible as small colonies. In nutrient broth, the bacteria grows in the liquid, and is seen as a soupy substance, not as clearly distinguishable clumps. Nutrient agar typically contains

• 0.5 % Peptone
• 0.3 % beef extract/yeast extract
• 1.5 % agar
• 0.5% NaCl

distilled water

• pH adjusted to neutral (6.8) at 25 °C

Nutrient broth is made identically, except omitting the agar

دى التركيبه للناس ال بتحضر المديا عندها فى المعمل

انت عارف طريقه التخطيط على الاجار ازاى ولا لاء ان شاء الله دى سهله جدا وان شاء الله هنزل فيديو خاص بيها قريب جدا

بعد ما حضرتك عملت تخطيط على الاجار وزرعت العينه بتعتك بتضع العينه فى الحضلن لمده 24 ساعه

ملحوظه هاااااااااااااااااااااااااااااااااااااااااااامه

عند وضع الطبق فى الحضان يوضع مقلوب بحيث يكون الغطاء اسفل والطبق اعلى حتى لا يحدث تلوث للعينه ويتكون مياه بالطبق

بعد ما حضرتك حضنت العينه لمده 24 ساعه بتشوف النمو للبكتريا

وبعد ذالك تقوم بوضع المضادات الحيويه على الطبق وتتركها 24 ساعه اخرى

ثم النهايه وهى انك هتقراء النتيجه بتبداء تشوف اكبر كلير زون فى الطبق ال اثر بيها المضاد الحيوى وتكتب بالترتيب المضادات الحيويه

وتبدا تكتب

*Highly Sensitive to  :

Moderately Sensitive to

*Resistant to :

ودى بعض المضاداتالحيويه ال ممكن نستخدمهما مع مزرعه العين

-ciprofloxacine

-gentamicine

-ofloxacine

-tobramycine

-tetracycline

-fucidic acid

-moxifloxacine

-gatifloxacine

-neomycine

-polymyxine B sulphate

-gramicidine

-sulphacetamide sodium

دا رابط بيوضح

كيفية زراعة عينة مسحة الزور ( الحلق ) 1

Throat swab culture  1

http://www.youtube.com/watch?v=8uXhDt79KNQ&feature=related

====================================

رابعا

===

ودى اخر حاجه معانا ودى مهمه جدا لانك لازم تتكلم مع المريض وتقوله نصيحه مهمه وتحسسه انك مهتم جدا بيه ومتاثر على مرضه الا وهى خطوات الوقايه

–         غسل العين بالماء الدافىء والصابون

–         لاتشارك احد بالدواء ولا تستخدم ادويه احد

–         لا تستخدم العدسات الاصقه

–         عدم استخدام المكياج  لانه اولا حرام تخرج بيه من البيت بالنسبه للبنات

اذا كنت ممن يستخدم العدسات الاصقه يجب عليك عند وجود التهاب  فى العين لازم تروح للطبيب وتسئله عن افضل طريقه لتنظيف العدسات الاصقه

وفى النهايه يارب اكون افدتكم ولو بجزء بسيط جدا لمعلوماتكم

وانتظرونى مع حلقه اخرى ومزرعه اخرى

احمد عبدالله